洁净室动态微生物监测影响因素分析

最新版中国药典（2015年）要求无菌检查应在无菌条件下进行，试验环境必须达到无菌检查的要求，微生物限度检查的实验环境应符合微生物限度检查的要求。

今天，小编将带来对药品无菌检查洁净室核心区域的动态微生物监测方法，包括无菌检查洁净操作台、洁净室、操作人员进行动态微生物监测。监测项目包括沉降菌、浮游菌和表面微生物。

监测方法

一、沉降菌测试方法

依据《医药工业洁净室(区)沉降菌的测试方法》GB/T16294-2010，沉降碟直径90mm，动态测试时，培养皿暴露时间不大于4h，若操作时间长于4h，同一位置可使用多个沉降碟连续进行监测并累积计数。

二、浮游菌测试方法 

依据《医药工业洁净室(区)浮游菌的测试方 法》GB/T16293-2010，浮游菌每次最小采样量如表1。 

表1.最小采样量

三、表面微生物测试方法

依据中国药典2015年版4部通则 9205 药品洁净实验室微生物监测和控制指导原则中，表面微生物测定是对环境、设备和人员的表面微生物进行监测，方法包括接触碟法和擦拭法。

注意事项

一、移入洁净室的物品

1.移入洁净室的物品应尽可能经过高压湿热灭菌法或者干热灭菌法除菌。

2.减少类似塑料筐等无法进行高压湿热灭菌和干热灭菌的物品进入（用能灭菌的钢丝篮代替塑料筐装试验物品进入洁净室）。

3.避免使用一些容易引起消毒死角的器具和物品。

4.高压湿热灭菌和干热灭菌完成后，不能立即取出消毒物品，避免急速冷却，使灭菌物品内蒸汽冷凝造成负压而易污染。待下降至适宜温度后取出，并迅速移至洁净室。

二、使用的消毒液

1.用擦拭法消毒时，单独使用75%酒精的效果不够理想，75%的酒精有挥发性，作用时间短，对芽孢无效。

2.2%碘酒有快速、广谱的杀菌作用，对分枝杆菌、真菌、病毒和一些芽孢均有效，且稳定性好，具有持续杀菌的作用。

3.2%新洁尔灭对革兰阳性菌有较强的作用，对塑料、皮肤和橡皮具有清洁和消毒的双重作用。

4.0.2%～0.5%过氧乙酸水溶液为广谱杀菌剂，能杀死细菌繁殖体、芽孢、真菌与某些病毒。

5.将以上几种消毒剂有计划地交替使用,并增加消毒频率能达到更理想的消毒效果。

三、操作过程

在试验过程中，存在由于人员表面接触带来的交叉污染，特别是双手。

1.应在近火焰区进行操作，操作不应大幅度或快速移动。

2.尽量减少操作人员双手离开工作台的频率，操作人员手如果离开工作台，再回到工作台时应先喷洒75%的酒精，使手套各个部位都接触75%的酒精，然后用无菌酒精棉擦干。

3.在操作过程中应随时用无菌酒精棉擦拭双手。

4.提前将实验所需物品摆上工作台面，分左右两边摆放，方便左右手随时拿取。

5.实验人员应熟悉整个实验流程和监控要点，特别是操作人员工作服和手套表面微生物，防止操作时间过长，影响微生物监测结果。

此外，还应合理安排检品检查顺序，多批次样品同时检查时，将操作繁琐的检品尽量放在实验后程。